Nature.com ପରିଦର୍ଶନ କରିଥିବାରୁ ଧନ୍ୟବାଦ |ଆପଣ ବ୍ୟବହାର କରୁଥିବା ବ୍ରାଉଜର୍ ସଂସ୍କରଣରେ ସୀମିତ CSS ସମର୍ଥନ ଅଛି |ସର୍ବୋତ୍ତମ ଅଭିଜ୍ଞତା ପାଇଁ, ଆମେ ପରାମର୍ଶ ଦେଉଛୁ ଯେ ଆପଣ ଏକ ଅପଡେଟ୍ ବ୍ରାଉଜର୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ (କିମ୍ବା ଇଣ୍ଟରନେଟ୍ ଏକ୍ସପ୍ଲୋରରରେ ସୁସଙ୍ଗତତା ମୋଡ୍ ଅକ୍ଷମ କରନ୍ତୁ) |ମ meantime ିରେ ମ continued ିରେ, ନିରନ୍ତର ସମର୍ଥନ ନିଶ୍ଚିତ କରିବାକୁ, ଆମେ ଶ yles ଳୀ ଏବଂ ଜାଭାସ୍କ୍ରିପ୍ଟ ବିନା ସାଇଟ୍ ଉପସ୍ଥାପନ କରିବୁ |
ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା ଗୋଣ୍ଡାଇ ହେଉଛି ଏକ ଇଣ୍ଟ୍ରାସେଲୁଲାର୍ ପ୍ରୋଟୋଜୋନ୍ ପରଜାଇଟ୍ ଯାହା ସଂକ୍ରମିତ ହୋଷ୍ଟର ମାଇକ୍ରୋ ପରିବେଶକୁ ମୋଡ୍ୟୁଲେଟ୍ କରିଥାଏ ଏବଂ ମସ୍ତିଷ୍କ ଟ୍ୟୁମର ବୃଦ୍ଧି ଘଟଣା ସହିତ ଜଡିତ ଥିବା ଜଣା ପଡିଥାଏ |ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ, ଆମେ ଅନୁମାନ କରୁଛୁ ଯେ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା ସଂକ୍ରମଣରୁ ଏକ୍ସୋସୋମାଲ୍ miRNA-21 ମସ୍ତିଷ୍କ ଟ୍ୟୁମର ବୃଦ୍ଧିକୁ ପ୍ରୋତ୍ସାହିତ କରେ |ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା ସଂକ୍ରମିତ BV2 ମାଇକ୍ରୋଗ୍ଲିଆରୁ ଏକ୍ସୋଜୋମଗୁଡିକ ବର୍ଣ୍ଣିତ ହୋଇଥିଲା ଏବଂ U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣକରଣ ନିଶ୍ଚିତ କରାଯାଇଥିଲା |ଟକ୍ସୋପ୍ଲାସମା ଗୋଣ୍ଡାଇ ଏବଂ ଟ୍ୟୁମର ସର୍ଟିଂ ସହିତ ଜଡିତ ମାଇକ୍ରୋ ଆରଏନ୍ଏ ଏବଂ ମାଇକ୍ରୋ RNA-21A-5p ଆରେ ବ୍ୟବହାର କରି ଏକ୍ସୋସୋମାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋ ଆରଏନ୍ଏ ଏକ୍ସପ୍ରେସନ୍ ପ୍ରୋଫାଇଲ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା |ଆମେ ମଧ୍ୟ U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷରେ ଟ୍ୟୁମର-ଜଡିତ ଜିନ୍ ର mRNA ସ୍ତର ଅନୁସନ୍ଧାନ କରି ଏକ୍ସୋଜୋମରେ miR-21 ସ୍ତରକୁ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରି ଏବଂ ମାନବ U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷ ବିସ୍ତାର ଉପରେ ଏକ୍ସୋଜୋମର ପ୍ରଭାବକୁ ଅନୁସନ୍ଧାନ କରିଥିଲୁ |ଟକ୍ସୋପ୍ଲାସମା ଗୋଣ୍ଡାଇ ଦ୍ infected ାରା ସଂକ୍ରମିତ U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଏକ୍ସୋଜୋମରେ ମାଇକ୍ରୋ ଆରଏନ୍ଏ -21 ର ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ବୃଦ୍ଧି ପାଇଥାଏ ଏବଂ ଆଣ୍ଟିଟ୍ୟୁମର୍ ଜିନ୍ (FoxO1, PTEN, ଏବଂ PDCD4) ର କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ କମିଯାଏ |ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା ଦ୍ infected ାରା ସଂକ୍ରମିତ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷଗୁଡ଼ିକର ବିସ୍ତାରକୁ ପ୍ରବର୍ତ୍ତାଏ |ଏକ୍ସୋସୋମଗୁଡିକ ମାଉସ୍ ଟ୍ୟୁମର ମଡେଲରେ U87 କୋଷଗୁଡ଼ିକର ବୃଦ୍ଧିକୁ ପ୍ରବର୍ତ୍ତାଏ |ଆମେ ପରାମର୍ଶ ଦେଉଛୁ ଯେ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା ସଂକ୍ରମିତ BV2 ମାଇକ୍ରୋଗ୍ଲିଆରେ ବର୍ଦ୍ଧିତ ଏକ୍ସୋସୋମାଲ୍ miR-21 ଆଣ୍ଟିଟ୍ୟୁମର୍ ଜିନ୍ଗୁଡ଼ିକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରି U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷରେ କୋଷ ବୃଦ୍ଧି ପ୍ରୋତ୍ସାହକ ଭାବରେ ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରିପାରନ୍ତି |
ଆକଳନ କରାଯାଇଛି ଯେ 2018 ରେ ବିଶ୍ worldwide ରେ 18.1 ନିୟୁତରୁ ଅଧିକ ଉନ୍ନତ କର୍କଟ ରୋଗ ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଥିଲା ଏବଂ ପ୍ରତିବର୍ଷ ପ୍ରାୟ 297,000 କେନ୍ଦ୍ରୀୟ ସ୍ନାୟୁ ପ୍ରଣାଳୀ ଟ୍ୟୁମର୍ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଉଥିଲା (ସମସ୍ତ ଟ୍ୟୁମରର 1.6%) 1।ପୂର୍ବ ଅନୁସନ୍ଧାନରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ ମାନବ ମସ୍ତିଷ୍କ ଟ୍ୟୁମରର ବିକାଶ ପାଇଁ ବିପଦ କାରଣଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟରେ ବିଭିନ୍ନ ରାସାୟନିକ ଦ୍ରବ୍ୟ, ପାରିବାରିକ ଇତିହାସ ଏବଂ ହେଡ ଥେରାପିଟିଭ୍ ଏବଂ ଡାଇଗ୍ନୋଷ୍ଟିକ୍ ଉପକରଣରୁ ଆୟନାଇଜିଂ ବିକିରଣ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ |ତଥାପି, ଏହି କୁପ୍ରଭାବର ପ୍ରକୃତ କାରଣ ଜଣା ପଡିନାହିଁ |ବିଶ୍ worldwide ର ସମସ୍ତ କର୍କଟ ରୋଗର ପ୍ରାୟ 20% ସଂକ୍ରାମକ ଏଜେଣ୍ଟ ଦ୍ caused ାରା ହୋଇଥାଏ, ଜୀବାଣୁ, ଜୀବାଣୁ ଏବଂ ପରଜୀବୀ 3,4।ସଂକ୍ରାମକ ପାଥୋଜେନ ହୋଷ୍ଟ ସେଲର ଜେନେଟିକ ଯନ୍ତ୍ରକ dis ଶଳକୁ ବ୍ୟାହତ କରେ, ଯେପରିକି DNA ମରାମତି ଏବଂ କୋଷ ଚକ୍ର, ଏବଂ ଏହା କ୍ରନିକ୍ ପ୍ରଦାହ ଏବଂ ରୋଗ ପ୍ରତିରୋଧକ କ୍ଷମତାକୁ ନଷ୍ଟ କରିପାରେ |
ମାନବ କର୍କଟ ସହିତ ଜଡିତ ସଂକ୍ରାମକ ଏଜେଣ୍ଟଗୁଡିକ ହେଉଛି ସାଧାରଣ ଭାଇରାଲ୍ ପାଥୋଜେନ, ମାନବ ପାପିଲୋମାଭାଇରସ୍ ଏବଂ ହେପାଟାଇଟିସ୍ ବି ଏବଂ ସି ଜୀବାଣୁ।ମଣିଷ କର୍କଟ ରୋଗର ବିକାଶରେ ପରଜୀବୀମାନେ ମଧ୍ୟ ଏକ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରିପାରନ୍ତି |ବିଭିନ୍ନ ପରଜୀବୀ ପ୍ରଜାତି ଯଥା ସ୍କିଷ୍ଟୋସୋମା, ଓପିଶୋରଚିସ୍ ଭିଭେରିନି, ଓ ଫେଲାଇନ୍ସ, କ୍ଲୋନୋର୍ସିସ୍ ସିନେସିସ୍ ଏବଂ ହାଇମେନୋଲେପିସ୍ ନାନା ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରକାରର ମାନବ କର୍କଟରେ 6,7,8 ରେ ଜଡିତ ଥିଲେ।
ଟକ୍ସୋପ୍ଲାସ୍ମା ଗୋଣ୍ଡାଇ ହେଉଛି ଏକ ଇଣ୍ଟ୍ରାସେଲୁଲାର୍ ପ୍ରୋଟୋଜୋନ୍ ଯାହା ସଂକ୍ରମିତ ହୋଷ୍ଟ କୋଷଗୁଡ଼ିକର ମାଇକ୍ରୋ ପରିବେଶକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିଥାଏ |ଏହି ପରଜୀବୀ ବିଶ୍ population ର ଜନସଂଖ୍ୟାର ପ୍ରାୟ 30% ସଂକ୍ରମିତ ହେବ ବୋଲି ଆକଳନ କରାଯାଇଛି, ଯାହା ସମଗ୍ର ଜନସଂଖ୍ୟାକୁ 9,10 ରେ ବିପଦରେ ପକାଇଥାଏ |ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା ଗୋଣ୍ଡାଇ କେନ୍ଦ୍ରୀୟ ସ୍ନାୟୁ ପ୍ରଣାଳୀ (ସିଏନ୍ଏସ୍) ସମେତ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଅଙ୍ଗକୁ ସଂକ୍ରମିତ କରିପାରେ ଏବଂ ସାଂଘାତିକ ମେନିଞ୍ଜାଇଟିସ୍ ଏବଂ ଏନସେଫାଲାଇଟିସ୍ ଭଳି ଗୁରୁତର ରୋଗ ସୃଷ୍ଟି କରିପାରେ, ବିଶେଷତ imm ପ୍ରତିରୋପଣ ରୋଗୀମାନଙ୍କଠାରେ।ଅବଶ୍ୟ, ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା ଗୋଣ୍ଡାଇ ମଧ୍ୟ ସଂକ୍ରମିତ ହୋଷ୍ଟର ପରିବେଶକୁ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରିପାରିବ ଏବଂ ଇମ୍ୟୁନୋକମ୍ପେଟେଣ୍ଟ ବ୍ୟକ୍ତିବିଶେଷଙ୍କଠାରେ ପ୍ରତିରକ୍ଷା ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରି ଏକ ଅସାମାଜିକ କ୍ରୋନିକ୍ ସଂକ୍ରମଣର ରକ୍ଷଣାବେକ୍ଷଣକୁ ଆଗେଇ ନେଇପାରେ |କ Interest ତୁହଳର ବିଷୟ, ଟି.ଗୋଣ୍ଡାଇ ପ୍ରାଦୁର୍ଭାବ ଏବଂ ମସ୍ତିଷ୍କ ଟ୍ୟୁମର ରୋଗ ମଧ୍ୟରେ ସମ୍ପର୍କକୁ ଦୃଷ୍ଟିରେ ରଖି କେତେକ ରିପୋର୍ଟରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି ଯେ କ୍ରନିକ୍ ଟି ଗୋଣ୍ଡାଇ ସଂକ୍ରମଣ ହେତୁ ଭିଭୋ ହୋଷ୍ଟ ପରିବେଶ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଟ୍ୟୁମର ମାଇକ୍ରୋ ପରିବେଶ ସହିତ ସମାନ।
ଏକ୍ସୋସୋମଗୁଡିକ ଇଣ୍ଟରସେଲୁଲାର ଯୋଗାଯୋଗକାରୀ ଭାବରେ ଜଣାଶୁଣା ଯାହା ପଡୋଶୀ କୋଷଗୁଡ଼ିକରୁ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଏବଂ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ସହିତ ଜ bi ବିକ ବିଷୟବସ୍ତୁ ବିତରଣ କରିଥାଏ |ଏକ୍ସୋସୋମ ଟ୍ୟୁମର ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଜ ological ବ ପ୍ରକ୍ରିୟାକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିପାରିବ ଯେପରିକି ଆଣ୍ଟି-ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍, ଆଞ୍ଜିଜେନେସିସ୍ ଏବଂ ଟ୍ୟୁମର ମାଇକ୍ରୋ ପରିବେଶରେ ମେଟାଷ୍ଟାସିସ୍ |ବିଶେଷ ଭାବରେ, miRNAs (miRNAs), ଲମ୍ବରେ ପ୍ରାୟ 22 ଟି ନ୍ୟୁକ୍ଲିଓଟାଇଡ୍ କ୍ଷୁଦ୍ର ଅଣ-କୋଡିଂ RNA, ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ଜିନ୍ ନିୟନ୍ତ୍ରକ ଯାହାକି miRNA ଦ୍ ind ାରା ନିର୍ମିତ ସାଇଲେନ୍ସିଂ କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ (miRISC) ମାଧ୍ୟମରେ 30% ରୁ ଅଧିକ ମାନବ mRNA କୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିଥାଏ |ଟକ୍ସୋପ୍ଲାସମା ଗୋଣ୍ଡାଇ ସଂକ୍ରମିତ ହୋଷ୍ଟରେ miRNA ଅଭିବ୍ୟକ୍ତିକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରି ଜ bi ବିକ ପ୍ରକ୍ରିୟାକୁ ବାଧା ଦେଇପାରେ |ପରଜୀବୀମାନଙ୍କର ବଞ୍ଚିବାର କ strategy ଶଳ ହାସଲ କରିବା ପାଇଁ ହୋଷ୍ଟ miRNA ଗୁଡ଼ିକ ହୋଷ୍ଟ ଜ bi ବିକ ପ୍ରକ୍ରିୟାଗୁଡ଼ିକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିବା ପାଇଁ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ସଙ୍କେତ ଧାରଣ କରିଥାଏ |ତେଣୁ, T. gondii ସହିତ ସଂକ୍ରମଣ ପରେ ହୋଷ୍ଟ miRNA ପ୍ରୋଫାଇଲରେ ହୋଇଥିବା ପରିବର୍ତ୍ତନଗୁଡ଼ିକୁ ଅଧ୍ୟୟନ କରିବା ଦ୍ୱାରା ହୋଷ୍ଟ ଏବଂ T. gondii ମଧ୍ୟରେ ଥିବା ପାରସ୍ପରିକ କଥାବାର୍ତ୍ତାକୁ ଅଧିକ ସ୍ପଷ୍ଟ ଭାବରେ ବୁ understand ିବାରେ ସାହାଯ୍ୟ କରିବ |ପ୍ରକୃତରେ, ଥିରୁଗନାନମ୍ ଏବଂ ଅନ୍ୟମାନେ |15 ପରାମର୍ଶ ଦେଇଛନ୍ତି ଯେ ଟି.ଗୋଣ୍ଡାଇ ଟ୍ୟୁମର ବୃଦ୍ଧି ସହିତ ଜଡିତ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ହୋଷ୍ଟ miRNA ଉପରେ ଏହାର ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ପରିବର୍ତ୍ତନ କରି ମସ୍ତିଷ୍କ କର୍କିନୋଜେନେସିସ୍ କୁ ପ୍ରୋତ୍ସାହିତ କରନ୍ତି ଏବଂ ଜାଣିବାକୁ ପାଇଲେ ଯେ ଟି ଗୋଣ୍ଡି ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ପ୍ରାଣୀମାନଙ୍କରେ ଗ୍ଲୋମା ସୃଷ୍ଟି କରିପାରନ୍ତି |
ଏହି ଅଧ୍ୟୟନ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା BV2 ଦ୍ infected ାରା ସଂକ୍ରମିତ ହୋଷ୍ଟ ମାଇକ୍ରୋଗ୍ଲିଆରେ ଏକ୍ସୋସୋମାଲ୍ miR-21 ର ପରିବର୍ତ୍ତନ ଉପରେ ଧ୍ୟାନ ଦେଇଥାଏ |FoxO1 / p27 ର ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟସରେ ରଖିବା ହେତୁ U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷର ବୃଦ୍ଧିରେ ପରିବର୍ତ୍ତିତ ଏକ୍ସୋସୋମାଲ୍ miR-21 ର ଏକ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ଭୂମିକା ଆମେ ଦେଖିଲୁ, ଯାହା ଅତ୍ୟଧିକ ଚାପଗ୍ରସ୍ତ miR-21 ର ଲକ୍ଷ୍ୟ ଅଟେ |
BV2 ରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ ଏକ୍ସୋସୋମଗୁଡିକ ଡିଫେରିଏଲ୍ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇଥିଲା ଏବଂ ସେଲୁଲାର୍ ଉପାଦାନ କିମ୍ବା ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଭେସିକଲ୍ ସହିତ ପ୍ରଦୂଷଣକୁ ରୋକିବା ପାଇଁ ବିଭିନ୍ନ ପଦ୍ଧତି ଦ୍ୱାରା ବ valid ଧ କରାଯାଇଥିଲା |SDS-polyacrylamide gel ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ (SDS-PAGE) BV2 କୋଷ ଏବଂ ଏକ୍ସୋଜୋମରୁ ବାହାର କରାଯାଇଥିବା ପ୍ରୋଟିନ୍ ମଧ୍ୟରେ ପୃଥକ s ାଞ୍ଚା ଦେଖାଇଲା (ଚିତ୍ର 1 ଏ), ଏବଂ ଆଲିକ୍ସର ଉପସ୍ଥିତି ପାଇଁ ନମୁନାଗୁଡିକ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଇଥିଲା, ଯାହା ପାଶ୍ଚାତ୍ୟ ବ୍ଲୋଟିଂ ଦ୍ୱାରା ଏକ୍ସୋସୋମାଲ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ ମାର୍କର ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା |ଏକ୍ସକ୍ସୋମ ପ୍ରୋଟିନରେ ଆଲିକ୍ସ ଲେବେଲିଂ ମିଳିଥିଲା ​​କିନ୍ତୁ BV2 ସେଲ୍ ଲାଇସେଟ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ (ଚିତ୍ର 1 ବି) ରେ ନୁହେଁ |ଏଥିସହ, BV2 ରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ ଏକ୍ସୋଜୋମରୁ ଶୁଦ୍ଧ RNA ଏକ ବାୟୋନାଲିଜର ବ୍ୟବହାର କରି ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା |18S ଏବଂ 28S ରାଇବୋସୋମାଲ୍ ସବନିଟ୍ ଗୁଡିକ ଏକ୍ସୋସୋମାଲ୍ RNA ସ୍ଥାନାନ୍ତରଣ pattern ାଞ୍ଚାରେ କ୍ୱଚିତ୍ ଦେଖାଗଲା, ଯାହା ନିର୍ଭରଯୋଗ୍ୟ ଶୁଦ୍ଧତା ସୂଚାଇଥାଏ (ଚିତ୍ର 1C) |ଶେଷରେ, ଟ୍ରାନ୍ସମିସନ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋନ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି ଦର୍ଶାଇଲା ଯେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ଏକ୍ସୋଜୋମଗୁଡିକ ପ୍ରାୟ 60-150 nm ଆକାରରେ ଥିଲା ଏବଂ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ମର୍ଫୋଲୋଜିର ଏକ କପ୍ ପରି ଗଠନ ଥିଲା (ଚିତ୍ର 1D) |
BV2 କୋଷରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ ଏକ୍ସୋଜୋମର ଚରିତ୍ରକରଣ |(କ) ସୁରକ୍ଷା ଡାଟା ସିଟ୍ ପୃଷ୍ଠା |ପ୍ରୋଟିନ୍ BV2 କୋଷରୁ କିମ୍ବା BV2 ରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ ଏକ୍ସୋଜୋମରୁ ପୃଥକ କରାଯାଇଥିଲା |କୋଷ ଏବଂ ଏକ୍ସୋଜୋମ ମଧ୍ୟରେ ପ୍ରୋଟିନ୍ s ାଞ୍ଚା ଭିନ୍ନ |(ଖ) ଏକ ଏକ୍ସୋସୋମାଲ୍ ମାର୍କର (ଆଲିକ୍ସ) ର ପାଶ୍ଚାତ୍ୟ ବ୍ଲଟ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ |(ଗ) BV2 କୋଷରୁ ବିଶୁଦ୍ଧ RNA ର ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ ଏବଂ ବାୟୋନାଲିଜର ବ୍ୟବହାର କରି BV2 ନିର୍ଗତ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ |ଏହିପରି, BV2 କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ 18S ଏବଂ 28S ରାଇବୋସୋମାଲ୍ ସବନିଟ୍ କ୍ୱଚିତ୍ ଏକ୍ସୋସୋମାଲ୍ RNA ରେ ମିଳିଲା |(ଘ) ଟ୍ରାନ୍ସମିସନ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି ଦର୍ଶାଇଲା ଯେ BV2 କୋଷରୁ ବିଚ୍ଛିନ୍ନ ହୋଇଥିବା ଏକ୍ସୋଜୋମଗୁଡିକ ନକାରାତ୍ମକ ଭାବରେ 2% ୟୁରାନିଲ୍ ଆସେଟେଟ୍ ସହିତ ଦାଗଯୁକ୍ତ |ଏକ୍ସୋସୋମଗୁଡିକ ପ୍ରାୟ 60-150 nm ଆକାର ଏବଂ କପ୍ ଆକୃତିର (ଗୀତ ଏବଂ ଜଙ୍ଗ, ପ୍ରକାଶିତ ତଥ୍ୟ) |
କନଫୋକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି ବ୍ୟବହାର କରି U87 ମାନବ ଗ୍ଲୋମା କୋଷରେ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମର ସେଲୁଲାର୍ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣକରଣ ଦେଖାଗଲା |PKH26 ନାମକ ଏକ୍ସୋସୋମଗୁଡିକ U87 କୋଷଗୁଡ଼ିକର ସାଇଟୋପ୍ଲାଜରେ ସ୍ଥାନିତ ହୋଇଛି |ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟଗୁଡିକ DAPI (ଚିତ୍ର 2A) ସହିତ ଦାଗଯୁକ୍ତ ଥିଲା, ସୂଚାଇଥାଏ ଯେ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମଗୁଡିକ ହୋଷ୍ଟ କୋଷଗୁଡ଼ିକ ଦ୍ୱାରା ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ହୋଇପାରିବ ଏବଂ ଗ୍ରହୀତା କୋଷର ପରିବେଶକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିପାରିବ |
U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷରେ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମର ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣକରଣ ଏବଂ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା RH ଦ୍ infected ାରା ସଂକ୍ରମିତ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷର ବିସ୍ତାରକୁ ପ୍ରବର୍ତ୍ତାଇଲା |(କ) କନଫୋକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି ଦ୍ୱାରା ମାପ କରାଯାଉଥିବା U87 କୋଷଗୁଡ଼ିକ ଦ୍ୱାରା ଆବଦ୍ଧ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ |U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷଗୁଡିକ PKH26 (ନାଲି) ସହିତ ଲେବଲ୍ ହୋଇଥିବା ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ସହିତ କିମ୍ବା 24 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ବିନା ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା |ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟଗୁଡିକ DAPI (ନୀଳ) ସହିତ ଦାଗଯୁକ୍ତ ଏବଂ ତା’ପରେ ଏକ କନଫୋକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପ୍ (ସ୍କେଲ୍ ବାର୍: 10 μm, x 3000) ଅଧୀନରେ ଦେଖାଗଲା |(ଖ) U87 ଗ୍ଲୋମା ସେଲ୍ ବିସ୍ତାର କୋଷ ବିସ୍ତାର ଅନୁସନ୍ଧାନ ଦ୍ୱାରା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା |ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ସମୟ ପାଇଁ U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷଗୁଡିକ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ସହିତ ଚିକିତ୍ସା କରାଯାଉଥିଲା | * P <0.05 ଛାତ୍ରଙ୍କ t ପରୀକ୍ଷା ଦ୍ୱାରା ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇଥିଲା | * P <0.05 ଛାତ୍ରଙ୍କ t ପରୀକ୍ଷା ଦ୍ୱାରା ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇଥିଲା | * P <0,05 получено по t-критерию Стьюдента। * ଛାତ୍ରଙ୍କ ଟି-ଟେଷ୍ଟ ଦ୍ୱାରା P <0.05 | * P <0.05 通过 学生 t 检验 获得。 * P <0.05 * P <0,05, полученный с помощью t-критерия Стьюдента। * P <0.05 ଛାତ୍ରଙ୍କ ଟି-ଟେଷ୍ଟ ବ୍ୟବହାର କରି ପ୍ରାପ୍ତ |
U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷରେ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମର ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣକରଣ ନିଶ୍ଚିତ କରିବା ପରେ, ମାନବ ଗ୍ଲୋମା କୋଷର ବିକାଶରେ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା-ନିର୍ଗତ ଏକ୍ସୋଜୋମର ଭୂମିକା ଅନୁସନ୍ଧାନ ପାଇଁ ଆମେ କୋଷ ବିସ୍ତାର ଅନୁଧ୍ୟାନ କରିଥିଲୁ |T. gondii- ସଂକ୍ରମିତ BV2 କୋଷରୁ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ସହିତ U87 କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଚିକିତ୍ସା ଦର୍ଶାଇଲା ଯେ ଟି ଗୋଣ୍ଡି-ସଂକ୍ରମିତ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ତୁଳନାରେ U87 କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଯଥେଷ୍ଟ ଅଧିକ ବୃଦ୍ଧି ଘଟାଇଲା (ଚିତ୍ର 2 ବି) |
ଏଥିସହ, U118 କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଅଭିବୃଦ୍ଧି U87 ସହିତ ସମାନ ଫଳାଫଳ ପାଇଥିଲା, ଯେହେତୁ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା ଉତ୍ତେଜିତ ଏକ୍ସୋଜୋମଗୁଡିକ ସର୍ବାଧିକ ସ୍ତରର ବିସ୍ତାର ସୃଷ୍ଟି କରିଥିଲା ​​(ତଥ୍ୟ ଦର୍ଶାଯାଇ ନାହିଁ) |ଏହି ତଥ୍ୟ ଉପରେ ଆଧାର କରି, ଆମେ ସୂଚାଇ ପାରିବା ଯେ ଗ୍ଲୋମା ସେଲ୍ ବିସ୍ତାରରେ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା ସଂକ୍ରମିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରିଥାଏ |
ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା ସଂକ୍ରମିତ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମର ଟ୍ୟୁମର ବିକାଶ ଉପରେ ଏହାର ପ୍ରଭାବ ଅନୁସନ୍ଧାନ କରିବାକୁ, ଆମେ ଜେନୋଗ୍ରାଫ୍ଟ ମଡେଲ ପାଇଁ U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷକୁ ନଗ୍ନ ମୂଷାରେ ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ଦେଇ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ କିମ୍ବା RH- ସଂକ୍ରମିତ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମକୁ ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ଦେଇଥିଲୁ |1 ସପ୍ତାହ ପରେ ଟ୍ୟୁମର ସ୍ପଷ୍ଟ ହେବା ପରେ, 5 ଟି ମୂଷାର ପ୍ରତ୍ୟେକ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଗୋଷ୍ଠୀ ସମାନ ପ୍ରାରମ୍ଭ ବିନ୍ଦୁ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବା ପାଇଁ ଟ୍ୟୁମର ଆକାର ଅନୁଯାୟୀ ବିଭକ୍ତ ହେଲା ଏବଂ ଟ୍ୟୁମର ଆକାର 22 ଦିନ ମାପ କରାଯାଇଥିଲା |
U87 ଜେନୋଗ୍ରାଫ୍ଟ ମଡେଲ ସହିତ ମୂଷାମାନଙ୍କରେ, BV2- ପ୍ରାପ୍ତ RH- ସଂକ୍ରମିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ ଗ୍ରୁପରେ 22 ଦିନ (ଚିତ୍ର 3A, B) ରେ ଯଥେଷ୍ଟ ବଡ଼ ଟ୍ୟୁମର ଆକାର ଏବଂ ଓଜନ ପରିଲକ୍ଷିତ ହୋଇଥିଲା |ଅନ୍ୟ ପଟେ, ଏକ୍ସୋସୋମ ଚିକିତ୍ସା ପରେ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ ଗ୍ରୁପ୍ ଏବଂ କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ ଗ୍ରୁପ୍ ମଧ୍ୟରେ ଟ୍ୟୁମର ଆକାରରେ କ significant ଣସି ବିଶେଷ ପାର୍ଥକ୍ୟ ନଥିଲା |ଏଥିସହ, ଗ୍ଲୋମା କୋଷ ଏବଂ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ସହିତ ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ଦିଆଯାଇଥିବା ମୂଷାମାନେ RH- ସଂକ୍ରମିତ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ (ଚିତ୍ର 3C) ଗୋଷ୍ଠୀର ସର୍ବ ବୃହତ ଟ୍ୟୁମର ପରିମାଣକୁ ଦୃଶ୍ୟମାନ ଭାବରେ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରିଥିଲେ |ଏହି ଫଳାଫଳଗୁଡିକ ଦର୍ଶାଏ ଯେ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା ସଂକ୍ରମିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ମାଉସ୍ ଟ୍ୟୁମର ମଡେଲରେ ଗ୍ଲୋମା ବୃଦ୍ଧି କରିଥାଏ |
U87 ଜେନୋଗ୍ରାଫ୍ଟ ମାଉସ୍ ମଡେଲରେ BV2- ପ୍ରାପ୍ତ ଏକ୍ସୋଜୋମର ଅନକୋଜେନେସିସ୍ (AC) |BV2 ରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ RH- ସଂକ୍ରମିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ ସହିତ ଚିକିତ୍ସିତ BALB / c ନଗ୍ନ ମୂଷାରେ ଟ୍ୟୁମର ଆକାର (A) ଏବଂ ଓଜନ (B) ଯଥେଷ୍ଟ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା |ମାଟ୍ରିଗେଲ ମିଶ୍ରଣରେ ନିଲମ୍ବିତ 1 x 107 U87 କୋଷ ସହିତ BALB / c ନଗ୍ନ ମୂଷା (C) ସବକ୍ୟୁଟାନେକ୍ସରେ ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ଦିଆଗଲା |ଇଞ୍ଜେକ୍ସନର ଛଅ ଦିନ ପରେ, 100 μg BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ମୂଷାରେ ଚିକିତ୍ସିତ ହେଲା |ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଦିନରେ ଏବଂ ବଳିଦାନ ପରେ ଯଥାକ୍ରମେ ଟ୍ୟୁମର ଆକାର ଏବଂ ଓଜନ ମାପ କରାଯାଇଥିଲା | * P <0.05 * P <0.05 * Р <0,05 * P <0.05 * P <0.05。 * P <0.05。 * Р <0,05 * P <0.05
ତଥ୍ୟ ଦର୍ଶାଇଲା ଯେ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା RH ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ (ଚିତ୍ର 4A) ସଂକ୍ରମଣ ପରେ ମାଇକ୍ରୋଗ୍ଲିଆରେ ରୋଗ ପ୍ରତିରୋଧକ ଶକ୍ତି କିମ୍ବା ଟ୍ୟୁମର ବିକାଶ ସହିତ ଜଡିତ 37 miRNA (16 ଅତ୍ୟଧିକ ସଙ୍କୋଚିତ ଏବଂ 21 ଡାଉନପ୍ରେସଡ୍) ମାଇକ୍ରୋଗ୍ଲିଆରେ ଯଥେଷ୍ଟ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରାଯାଇଥିଲା |ପରିବର୍ତ୍ତିତ miRNA ଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟରେ miR-21 ର ଆପେକ୍ଷିକ ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ସ୍ତରଗୁଡିକ BV2 ରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍, BV2 ଏବଂ U87 କୋଷଗୁଡ଼ିକ ସହିତ ଚିକିତ୍ସିତ ଏକ୍ସୋଜୋମରେ ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ RT-PCR ଦ୍ୱାରା ନିଶ୍ଚିତ କରାଯାଇଥିଲା |MiR-21 ର ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା ଗୋଣ୍ଡାଇ (RH ଷ୍ଟ୍ରେନ୍) (ଚିତ୍ର 4B) ଦ୍ infected ାରା ସଂକ୍ରମିତ BV2 କୋଷରୁ ଏକ୍ସୋଜୋମର ଏକ ମହତ୍ତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ବୃଦ୍ଧି ଦେଖାଇଲା |BV2 ଏବଂ U87 କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ miR-21 ର ଆପେକ୍ଷିକ ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ସ୍ତରଗୁଡ଼ିକ ପରିବର୍ତ୍ତିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ (ଚିତ୍ର 4B) ପାଇବା ପରେ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା |ଟ୍ୟୁମର ରୋଗୀ ଏବଂ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାସମା ଗୋଣ୍ଡାଇ (ME49 ଷ୍ଟ୍ରେନ୍) ରେ ସଂକ୍ରମିତ ମୂଷାଙ୍କ ମସ୍ତିଷ୍କ ଟିସୁରେ miR-21 ଅଭିବ୍ୟକ୍ତିର ଆପେକ୍ଷିକ ସ୍ତର ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଅପେକ୍ଷା ଅଧିକ ଥିଲା (ଚିତ୍ର 4C) |ଏହି ଫଳାଫଳଗୁଡିକ ଭିଟ୍ରୋ ଏବଂ ଭିଭୋରେ ପୂର୍ବାନୁମାନିତ ଏବଂ ନିଶ୍ଚିତ ହୋଇଥିବା ମାଇକ୍ରୋ ଆରଏନ୍ଏସ୍ ର ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ସ୍ତର ମଧ୍ୟରେ ପାର୍ଥକ୍ୟ ସହିତ ଜଡିତ |
ଟକ୍ସୋପ୍ଲାସମା ଗୋଣ୍ଡାଇ (RH) ଦ୍ infected ାରା ସଂକ୍ରମିତ ମାଇକ୍ରୋଗ୍ଲିଆରେ ଏକ୍ସୋସୋମାଲ୍ miP-21a-5p ର ଅଭିବ୍ୟକ୍ତିରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ |(କ) T. gondii RH ସଂକ୍ରମଣ ପରେ ରୋଗ ପ୍ରତିରୋଧକ ଶକ୍ତି କିମ୍ବା ଟ୍ୟୁମର ବିକାଶ ସହିତ ଜଡିତ siRNA ରେ ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ପରିବର୍ତ୍ତନ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରେ |(ଖ) ଆପେକ୍ଷିକ miR-21 ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ସ୍ତରଗୁଡିକ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍, BV2- ଚିକିତ୍ସିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ଏବଂ U87 କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ RT-PCR ଦ୍ୱାରା ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଥିଲା |(ଗ) ଆପେକ୍ଷିକ miR-21 ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ସ୍ତର ଟ୍ୟୁମର ରୋଗୀଙ୍କ ମସ୍ତିଷ୍କ ଟିସୁ (N = 3) ଏବଂ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା ଗୋଣ୍ଡାଇ (ME49 ଷ୍ଟ୍ରେନ୍) (N = 3) ରେ ସଂକ୍ରମିତ ମୂଷାମାନଙ୍କଠାରେ ମିଳିଲା | * P <0.05 ଛାତ୍ରଙ୍କ t ପରୀକ୍ଷା ଦ୍ୱାରା ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇଥିଲା | * P <0.05 ଛାତ୍ରଙ୍କ t ପରୀକ୍ଷା ଦ୍ୱାରା ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇଥିଲା | * P <0,05 было получено с помощью t-критерия Стьюдента। * P <0.05 ଛାତ୍ରଙ୍କ ଟି-ଟେଷ୍ଟ ବ୍ୟବହାର କରି ପ୍ରାପ୍ତ ହେଲା | * P <0.05 通过 学生 t 检验 获得。 * P <0.05 * P <0,05, полученный с помощью t-критерия Стьюдента। * P <0.05 ଛାତ୍ରଙ୍କ ଟି-ଟେଷ୍ଟ ବ୍ୟବହାର କରି ପ୍ରାପ୍ତ |
RH- ସଂକ୍ରମିତ BV2 କୋଷରୁ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ଭିଭୋ ଏବଂ ଭିଟ୍ରୋରେ ଗ୍ଲୋମାସ୍ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା (ଚିତ୍ର 2, 3) |ପ୍ରାସଙ୍ଗିକ mRNA ଗୁଡ଼ିକୁ ଚିହ୍ନଟ କରିବା ପାଇଁ, ଆମେ BV2 କିମ୍ବା RH BV2 ରୁ ନିର୍ଗତ ଏକ୍ସୋଜୋମ ଦ୍ infected ାରା ସଂକ୍ରମିତ U87 କୋଷରେ ଆଣ୍ଟିଟ୍ୟୁମର୍ ଟାର୍ଗେଟ୍ ଜିନ୍, ଫର୍କହେଡ୍ ବାକ୍ସ O1 (FoxO1), PTEN ଏବଂ ପ୍ରୋଗ୍ରାମ ହୋଇଥିବା ସେଲ୍ ମୃତ୍ୟୁ 4 (PDCD4) ପରୀକ୍ଷା କରିଥିଲୁ |ବାୟୋନ୍ଫର୍ମାଟିକ୍ସ ବିଶ୍ଳେଷଣରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ FoxO1, PTEN, ଏବଂ PDCD4 ଜିନ୍ ସହିତ ଅନେକ ଟ୍ୟୁମର୍-ଜଡିତ ଜିନ୍, miR-2121,22 ବାନ୍ଧିବା ସ୍ଥାନ ଅଛି |RV- ସଂକ୍ରମିତ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମରେ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ (ଚିତ୍ର 5A) ତୁଳନାରେ ଆଣ୍ଟିଟୁମୋର ଟାର୍ଗେଟ ଜିନ୍ ର mRNA ସ୍ତର ହ୍ରାସ ପାଇଲା |FoxO1 BH2- ପ୍ରାପ୍ତ ଏକ୍ସୋଜୋମ ତୁଳନାରେ RH- ସଂକ୍ରମିତ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମରେ ପ୍ରୋଟିନ୍ ସ୍ତର ହ୍ରାସ କଲା (ଚିତ୍ର 5B) |ଏହି ଫଳାଫଳଗୁଡିକ ଉପରେ ଆଧାର କରି, ଆମେ ନିଶ୍ଚିତ କରିପାରୁ ଯେ RH- ସଂକ୍ରମିତ BV2 ରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ଆଣ୍ଟି-ଅଙ୍କୋଜେନିକ୍ ଜିନ୍ଗୁଡ଼ିକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିଥାଏ, ଟ୍ୟୁମର ବୃଦ୍ଧିରେ ସେମାନଙ୍କର ଭୂମିକା ବଜାୟ ରଖେ |
ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା RH- ସଂକ୍ରମିତ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମଗୁଡିକ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା RH- ସଂକ୍ରମିତ BV2- ନିର୍ଗତ ଏକ୍ସୋଜୋମ ଦ୍ U ାରା U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷରେ ଆଣ୍ଟିଟ୍ୟୁମୋର ଜିନ୍ ଦମନ କରିଥାଏ |(କ) PBS ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ତୁଳନାରେ T. gondii RH- ସଂକ୍ରମିତ BV2 ରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ ଏକ୍ସୋଜୋମରେ FoxO1, PTEN ଏବଂ PDCD4 ଅଭିବ୍ୟକ୍ତିର ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR |act- ଆକ୍ଟିନ୍ mRNA ଏକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହେଲା |(ଖ) FoxO1 ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ପାଶ୍ଚାତ୍ୟ ବ୍ଲୋଟିଂ ଦ୍ୱାରା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଇମେଜ୍ ପ୍ରୋଗ୍ରାମ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଡେନସାଇଟୋମେଟ୍ରୀ ତଥ୍ୟକୁ ପରିସଂଖ୍ୟାନିକ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଇଥିଲା | * P <0.05 ଛାତ୍ରଙ୍କ t ପରୀକ୍ଷା ଦ୍ୱାରା ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇଥିଲା | * P <0.05 ଛାତ୍ରଙ୍କ t ପରୀକ୍ଷା ଦ୍ୱାରା ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇଥିଲା | * P <0,05 было получено с помощью t-критерия Стьюдента। * P <0.05 ଛାତ୍ରଙ୍କ ଟି-ଟେଷ୍ଟ ବ୍ୟବହାର କରି ପ୍ରାପ୍ତ ହେଲା | * P <0.05 通过 学生 t 检验 获得。 * P <0.05 * P <0,05, полученный с помощью t-критерия Стьюдента। * P <0.05 ଛାତ୍ରଙ୍କ ଟି-ଟେଷ୍ଟ ବ୍ୟବହାର କରି ପ୍ରାପ୍ତ |
ଟ୍ୟୁମର-ଜଡିତ ଜିନ୍ ନିୟାମନରେ ଏକ୍ସୋଜୋମରେ miP-21 ର ପ୍ରଭାବ ବୁ To ିବା ପାଇଁ, U87 କୋଷଗୁଡିକ ଲିପୋଫେକ୍ଟାମାଇନ୍ 2000 ବ୍ୟବହାର କରି miP-21 ର ଏକ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ସହିତ ସଂକ୍ରମଣ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ସଂକ୍ରମଣର 24 ଘଣ୍ଟା ପରେ କୋଷଗୁଡିକ ଅମଳ କରାଯାଇଥିଲା |MiR-21 ଇନହିବିଟର ସହିତ ସଂକ୍ରମିତ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ FoxO1 ଏବଂ p27 ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ସ୍ତରଗୁଡିକ qRT-PCR ବ୍ୟବହାର କରି BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ସହିତ ଚିକିତ୍ସିତ କୋଷଗୁଡ଼ିକ ସହିତ ତୁଳନା କରାଯାଇଥିଲା (ଚିତ୍ର 6A, B) |MiR-21 ଇନହିବିଟରର U87 କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ସଂକ୍ରମଣ FoxO1 ଏବଂ p27 ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି (FIG। 6) କୁ ଯଥେଷ୍ଟ ନିୟନ୍ତ୍ରିତ କଲା |
R8- ସଂକ୍ରମିତ ଏକ୍ସୋସୋମାଲ୍ BV2- ପ୍ରାପ୍ତ miP-21 U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ FoxO1 / p27 ଅଭିବ୍ୟକ୍ତିକୁ ପରିବର୍ତ୍ତନ କଲା |ଲିପୋଫେକ୍ଟାମାଇନ୍ 2000 ବ୍ୟବହାର କରି U87 କୋଷଗୁଡିକ miP-21 ଇନହିବିଟର ସହିତ ସଂକ୍ରମଣ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ସଂକ୍ରମଣର 24 ଘଣ୍ଟା ପରେ କୋଷଗୁଡିକ ଅମଳ କରାଯାଇଥିଲା |MiR-21 ଇନହିବିଟର ସହିତ ସଂକ୍ରମିତ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ FoxO1 ଏବଂ p27 ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ସ୍ତରକୁ qRT-PCR (A, B) ବ୍ୟବହାର କରି BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ସହିତ ଚିକିତ୍ସିତ କୋଷଗୁଡ଼ିକର ସ୍ତର ସହିତ ତୁଳନା କରାଯାଇଥିଲା |
ହୋଷ୍ଟର ପ୍ରତିରକ୍ଷା ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରୁ ରକ୍ଷା ପାଇବା ପାଇଁ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା ପରଜୀବୀ ଏକ ଟିସୁ ସିଷ୍ଟରେ ପରିଣତ ହୁଏ |ସେମାନେ ହୋଷ୍ଟର ଜୀବନସାରା ମସ୍ତିଷ୍କ, ହୃଦୟ ଏବଂ କଙ୍କାଳ ମାଂସପେଶୀ ସହିତ ବିଭିନ୍ନ ଟିସୁକୁ ପରଜୀବୀ କରନ୍ତି ଏବଂ ହୋଷ୍ଟର ପ୍ରତିରକ୍ଷା ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ମଡ୍ୟୁଲେଟ୍ କରନ୍ତି |ଏହା ସହିତ, ସେମାନେ କୋଷ ଚକ୍ର ଏବଂ ହୋଷ୍ଟ କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିପାରିବେ, ସେମାନଙ୍କର ବିସ୍ତାରକୁ 14,24 କୁ ପ୍ରୋତ୍ସାହିତ କରିପାରିବେ |ଟକ୍ସୋପ୍ଲାସ୍ମା ଗୋଣ୍ଡାଇ ମୁଖ୍ୟତ host ହୋଷ୍ଟ ଡେଣ୍ଡ୍ରାଇଟିସ୍ କୋଷ, ନିଉଟ୍ରୋଫିଲ୍ ଏବଂ ମୋନୋକାଇଟ୍ / ମାକ୍ରୋଫେଜ୍ ବଂଶକୁ ମସ୍ତିଷ୍କ ମାଇକ୍ରୋଗ୍ଲିଆକୁ ସଂକ୍ରମିତ କରିଥାଏ |ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା ଗୋଣ୍ଡାଇ M2 ଫେନୋଟାଇପ୍ ର ମାକ୍ରୋଫେଜ୍ ର ଭିନ୍ନତାକୁ ପ୍ରବର୍ତ୍ତାଏ, ପାଥୋଜେନ ସଂକ୍ରମଣ ପରେ କ୍ଷତ ଆରୋଗ୍ୟକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରେ ଏବଂ ହାଇପରଭାସ୍କୁଲାରାଇଜେସନ୍ ଏବଂ ଗ୍ରାନୁଲୋମାଟସ୍ ଫାଇବ୍ରୋସିସ୍ ସହିତ ମଧ୍ୟ ଜଡିତ |ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା ସଂକ୍ରମଣର ଏହି ଆଚରଣବିହୀନ ପାଥୋଜେନେସିସ୍ ଟ୍ୟୁମର ବିକାଶ ସହିତ ଜଡିତ ମାର୍କର ସହିତ ଜଡିତ ହୋଇପାରେ |ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା ଦ୍ reg ାରା ନିୟନ୍ତ୍ରିତ ଶତ୍ରୁ ପରିବେଶ ସଂପୃକ୍ତ ପୂର୍ବର ସଦୃଶ ହୋଇପାରେ |ତେଣୁ, ଏହା ଅନୁମାନ କରାଯାଇପାରେ ଯେ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା ସଂକ୍ରମଣ ମସ୍ତିଷ୍କ ଟ୍ୟୁମରର ବିକାଶରେ ସହାୟକ ହେବା ଉଚିତ୍ |ବାସ୍ତବରେ, ବିଭିନ୍ନ ମସ୍ତିଷ୍କ ଟ୍ୟୁମର ରୋଗୀଙ୍କ ସେରମ୍ରେ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା ସଂକ୍ରମଣର ଉଚ୍ଚ ହାର ରିପୋର୍ଟ କରାଯାଇଛି |ଏଥିସହ, ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା ଗୋଣ୍ଡାଇ ଅନ୍ୟ ଏକ କର୍କିନୋଜେନିକ୍ ଇଫେକ୍ଟର୍ ହୋଇପାରେ ଏବଂ ଅନ୍ୟ ସଂକ୍ରାମକ କର୍କିନୋଜେନଗୁଡିକର ମସ୍ତିଷ୍କ ଟ୍ୟୁମର ବିକାଶରେ ସାହାଯ୍ୟ କରିବା ପାଇଁ ସିନର୍ଜିଷ୍ଟିକ୍ କାର୍ଯ୍ୟ କରିଥାଏ |ଏହି ପରିପ୍ରେକ୍ଷୀରେ, ସୂଚନାଯୋଗ୍ୟ ଯେ ପି ଫାଲସିପାରମ୍ ଏବଂ ଏପଷ୍ଟାଇନ୍-ବାର୍ ଜୀବାଣୁ ବୁର୍କିଟ୍ଙ୍କ ଲିମ୍ଫୋମା ଗଠନରେ ସିନର୍ଜିଷ୍ଟିକ୍ ଭାବରେ ସହଯୋଗ କରନ୍ତି।
କର୍କଟ ଗବେଷଣା କ୍ଷେତ୍ରରେ ନିୟନ୍ତ୍ରକ ଭାବରେ ଏକ୍ସୋଜୋମର ଭୂମିକା ବ୍ୟାପକ ଭାବରେ ଅନୁସନ୍ଧାନ କରାଯାଇଛି |ତଥାପି, ପରଜୀବୀ ଏବଂ ସଂକ୍ରମିତ ହୋଷ୍ଟମାନଙ୍କ ମଧ୍ୟରେ ଏକ୍ସୋଜୋମର ଭୂମିକା ଖରାପ ବୁ understood ାପଡେ |ଏପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ, ଗୁପ୍ତ ପ୍ରୋଟିନ୍ ସମେତ ବିଭିନ୍ନ ନିୟାମକମାନେ ଜ bi ବିକ ପ୍ରକ୍ରିୟାଗୁଡ଼ିକୁ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରିଛନ୍ତି ଯାହା ଦ୍ prot ାରା ପ୍ରୋଟୋଜୋନ୍ ପରଜୀବୀମାନେ ହୋଷ୍ଟ ଆକ୍ରମଣକୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରନ୍ତି ଏବଂ ସଂକ୍ରମଣକୁ ଚିରସ୍ଥାୟୀ କରନ୍ତି।ସମ୍ପ୍ରତି, ଏକ ବ growing ୁଥିବା ଧାରଣା ଆସିଛି ଯେ ପ୍ରୋଟୋଜୋନ୍-ଜଡିତ ମାଇକ୍ରୋଭେସିକଲ୍ ଏବଂ ସେମାନଙ୍କର ମାଇକ୍ରୋ ଆରଏନ୍ଏସ୍ ହୋଷ୍ଟ କୋଷଗୁଡ଼ିକ ସହିତ ଯୋଗାଯୋଗ କରି ସେମାନଙ୍କ ବଞ୍ଚିବା ପାଇଁ ଏକ ଅନୁକୂଳ ପରିବେଶ ସୃଷ୍ଟି କରେ |ତେଣୁ, ପରିବର୍ତ୍ତିତ ଏକ୍ସୋସୋମାଲ୍ miRNA ଏବଂ ଗ୍ଲୋମା ସେଲ୍ ବିସ୍ତାର ମଧ୍ୟରେ ସମ୍ପର୍କ ଆବିଷ୍କାର କରିବାକୁ ଅଧିକ ଅଧ୍ୟୟନ ଆବଶ୍ୟକ |ମାଇକ୍ରୋ ଆରଏନ୍ଏ ପରିବର୍ତ୍ତନ (କ୍ଲଷ୍ଟର ଜିନ୍ miR-30c-1, miR-125b-2, miR-23b-27b-24-1 ଏବଂ miR-17-92) ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା ସଂକ୍ରମିତ ମାନବ ମାକ୍ରୋଫେଜରେ STAT3 ପ୍ରୋମୋଟର୍ ସହିତ ବାନ୍ଧେ, ନିୟନ୍ତ୍ରିତ ଏବଂ ଆଣ୍ଟି ପ୍ରବର୍ତ୍ତାଏ | ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା ଗୋଣ୍ଡାଇ ସଂକ୍ରମଣର ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ 29ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା ସଂକ୍ରମଣ miR-17-5p ଏବଂ miR-106b-5p ର ଅଭିବ୍ୟକ୍ତିକୁ ବ increases ାଇଥାଏ, ଯାହା ଅନେକ ହାଇପରପ୍ରୋଲିଫରେଟିଭ୍ ରୋଗ 30 ସହିତ ଜଡିତ |ଏହି ତଥ୍ୟଗୁଡିକ ସୂଚିତ କରେ ଯେ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା ସଂକ୍ରମଣ ଦ୍ୱାରା ନିୟନ୍ତ୍ରିତ ହୋଷ୍ଟ miRNA ଗୁଡିକ ପରଜୀବୀ ବଞ୍ଚିବା ଏବଂ ହୋଷ୍ଟ ଜ bi ବିକ ଆଚରଣରେ ପାଥୋଜେନେସିସ୍ ପାଇଁ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଅଣୁ ଅଟେ |
ପରିବର୍ତ୍ତିତ miRNA ଗୁଡ଼ିକ ଗ୍ଲୋମାସ୍ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରି କ୍ଷତିକାରକ କୋଷଗୁଡିକର ଆରମ୍ଭ ଏବଂ ପ୍ରଗତି ସମୟରେ ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରକାରର ଆଚରଣକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିପାରନ୍ତି: ଅଭିବୃଦ୍ଧି ସଙ୍କେତର ଆତ୍ମନିର୍ଭରଶୀଳତା, ଅଭିବୃଦ୍ଧି ପ୍ରତିରୋଧକ ସଙ୍କେତ ପ୍ରତି ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା, ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ ଏଡାଇବା, ଅସୀମିତ ପ୍ରତିକୃତି ସମ୍ଭାବନା, ଆଞ୍ଜିଜେନେସିସ୍, ଆକ୍ରମଣ ଏବଂ ମେଟାଷ୍ଟାସିସ୍ ଏବଂ ପ୍ରଦାହ |ଗ୍ଲୋୟୋମାରେ, ପରିବର୍ତ୍ତିତ miRNA ଗୁଡ଼ିକୁ ଅନେକ ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ପ୍ରୋଫାଇଲ୍ ଅଧ୍ୟୟନରେ ଚିହ୍ନଟ କରାଯାଇଛି |
ବର୍ତ୍ତମାନର ଅଧ୍ୟୟନରେ, ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା ସଂକ୍ରମିତ ହୋଷ୍ଟ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଆମେ ଉଚ୍ଚ ସ୍ତରର miRNA-21 ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ନିଶ୍ଚିତ କରିଛୁ |miR-21 କଠିନ ଟ୍ୟୁମରରେ ଅତ୍ୟଧିକ ଅତ୍ୟଧିକ ଚାପଗ୍ରସ୍ତ ମାଇକ୍ରୋ ଆରଏନ୍ଏ ଭାବରେ ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଛି, ଗ୍ଲୋମାସ୍, 33 ଏବଂ ଏହାର ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ଗ୍ଲୋମା ଗ୍ରେଡ୍ ସହିତ ଜଡିତ |ସଂଗୃହିତ ପ୍ରମାଣ ସୂଚିତ କରେ ଯେ miR-21 ହେଉଛି ଏକ ଉପନ୍ୟାସ ଅନ୍‌କୋଜେନ ଯାହା ଗ୍ଲୋମା ବୃଦ୍ଧିରେ ଆଣ୍ଟି-ଆପୋପୋଟୋଟିକ୍ ଫ୍ୟାକ୍ଟର୍ ଭାବରେ କାର୍ଯ୍ୟ କରିଥାଏ ଏବଂ ମାନବ ମସ୍ତିଷ୍କର କୁପ୍ରଭାବର ଟିସୁ ଏବଂ ପ୍ଲାଜାରେ ଅତ୍ୟଧିକ ଚାପଗ୍ରସ୍ତ |କ Interest ତୁହଳର ବିଷୟ, ଗ୍ଲୋମା କୋଷ ଏବଂ ଟିସୁରେ miR-21 ନିଷ୍କ୍ରିୟତା, କାସପେଜ୍-ନିର୍ଭରଶୀଳ ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ କାରଣରୁ କୋଷ ବିସ୍ତାରର ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ସୃଷ୍ଟି କରେ |MiR-21 ପୂର୍ବାନୁମାନ କରାଯାଇଥିବା ଲକ୍ଷ୍ୟଗୁଡିକର ବାୟୋ ଇନଫର୍ମାଟିକ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣରେ ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ ପଥ ସହିତ ଜଡିତ ଏକାଧିକ ଟ୍ୟୁମର୍ ଦମନକାରୀ ଜିନ୍ ପ୍ରକାଶ ପାଇଲା, ଯେଉଁଥିରେ ପ୍ରୋଗ୍ରାମ ହୋଇଥିବା ସେଲ୍ ମୃତ୍ୟୁ 4 (PDCD4), ଟ୍ରପୋମିଓସିନ୍ (TPM1), PTEN, ଏବଂ ଫର୍କହେଡ୍ ବାକ୍ସ O1 (FoxO1), miR-2121 ବାନ୍ଧିବା ସ୍ଥାନ ସହିତ |.22.38
FoxO1, ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ଫ୍ୟାକ୍ଟର୍ ମଧ୍ୟରୁ ଗୋଟିଏ ଭାବରେ (FoxO), ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରକାରର ମାନବ କର୍କଟ ରୋଗର ବିକାଶରେ ଜଡିତ ଏବଂ p21, p27, Bim, ଏବଂ FasL40 ପରି ଟ୍ୟୁମର ଦମନକାରୀ ଜିନ୍ ର ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିପାରିବ |କୋଷ ବୃଦ୍ଧିକୁ ଦମନ କରିବା ପାଇଁ FoxO1 ସେଲ୍ ଚକ୍ର ଇନହିବିଟରଗୁଡ଼ିକୁ ବାନ୍ଧ ଏବଂ ସକ୍ରିୟ କରିପାରିବ |ଅଧିକନ୍ତୁ, FoxO1 ହେଉଛି PI3K / Akt ସଙ୍କେତର ଏକ ପ୍ରମୁଖ ପ୍ରଭାବକାରୀ ଏବଂ p2742 ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ଆକ୍ଟିଭେସନ୍ ମାଧ୍ୟମରେ ସେଲ୍ ଚକ୍ର ପ୍ରଗତି ଏବଂ ସେଲ୍ ଭିନ୍ନତା ପରି ଅନେକ ଜ ological ବ ପ୍ରକ୍ରିୟାକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିଥାଏ |
ପରିଶେଷରେ, ଆମେ ବିଶ୍ that ାସ କରୁ ଯେ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା ସଂକ୍ରମିତ ମାଇକ୍ରୋଗ୍ଲିଆରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ ଏକ୍ସୋସୋମାଲ୍ miR-21 ଗ୍ଲୋମା କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଅଭିବୃଦ୍ଧି ନିୟନ୍ତ୍ରକ ଭାବରେ ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରିପାରନ୍ତି (ଚିତ୍ର 7) |ତଥାପି, ଏକ୍ସୋସୋମାଲ୍ miR-21, ପରିବର୍ତ୍ତିତ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜ୍ମା ସଂକ୍ରମଣ ଏବଂ ଗ୍ଲୋମା ବୃଦ୍ଧି ମଧ୍ୟରେ ସିଧାସଳଖ ଲିଙ୍କ୍ ଖୋଜିବା ପାଇଁ ଅଧିକ ଅଧ୍ୟୟନ ଆବଶ୍ୟକ |ଏହି ଫଳାଫଳଗୁଡିକ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା ସଂକ୍ରମଣ ଏବଂ ଗ୍ଲୋମା ରୋଗର ସମ୍ପର୍କ ଅଧ୍ୟୟନ ପାଇଁ ଏକ ପ୍ରାରମ୍ଭ ବିନ୍ଦୁ ପ୍ରଦାନ କରିବ ବୋଲି ଆଶା କରାଯାଏ |
ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ ଗ୍ଲୋମା (ମସ୍ତିଷ୍କ) କର୍କିନୋଜେନେସିସ୍ ର ଯନ୍ତ୍ରର ଏକ ସ୍କିମେଟିକ୍ ଚିତ୍ର ପ୍ରସ୍ତାବିତ |ଲେଖକ ପାୱାରପଏଣ୍ଟ 2019 (ମାଇକ୍ରୋସଫ୍ଟ, ରେଡମଣ୍ଡ, WA) ରେ ଅଙ୍କନ କରନ୍ତି |
ଏହି ଅଧ୍ୟୟନର ସମସ୍ତ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍, ପଶୁମାନଙ୍କର ବ୍ୟବହାର ସମେତ ସିଓଲ୍ ନ୍ୟାସନାଲ୍ ୟୁନିଭରସିଟି ଆନିମଲ୍ କେୟାର ଏବଂ ୟୁଜର୍ କମିଟି ଷ୍ଟାଣ୍ଡାର୍ଡ ନ ical ତିକ ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ ଅନୁଯାୟୀ ହୋଇଥିଲା ଏବଂ ସିଓଲ୍ ନ୍ୟାସନାଲ ୟୁନିଭରସିଟି ସ୍କୁଲ୍ ଅଫ୍ ମେଡିସିନ୍ (ଆଇଆରବି ନମ୍ବର SNU-) ର ଅନୁଷ୍ଠାନିକ ସମୀକ୍ଷା ବୋର୍ଡ ଦ୍ୱାରା ଅନୁମୋଦିତ ହୋଇଥିଲା | 150715)-2) |ସମସ୍ତ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ପ୍ରକ୍ରିୟା ARRIVE ସୁପାରିଶ ଅନୁଯାୟୀ କରାଯାଇଥିଲା |
BV2 ମାଉସ୍ ମାଇକ୍ରୋଗ୍ଲିଆ ଏବଂ U87 ମାନବ ଗ୍ଲୋମା କୋଷଗୁଡ଼ିକ ଡଲବେକୋର ମୋଡିଫାଏଡ୍ ଇଗଲ୍ ମିଡିୟମ୍ (DMEM; ୱେଲଗେନ, ସିଓଲ୍, କୋରିଆ) ଏବଂ ରୋଜୱେଲ ପାର୍କ ମେମୋରିଆଲ୍ ଇନଷ୍ଟିଚ୍ୟୁଟ୍ର ମଧ୍ୟମ (RPMI; ୱେଲଜେନ୍) ରେ ସଂସ୍କୃତି ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇଥିଲା, ପ୍ରତ୍ୟେକରେ 10% ଭ୍ରୁଣ ବୋଭାଇନ୍ ସେରମ୍, 4 mM l- | ଗ୍ଲୁଟାମାଇନ୍, m। m ମିଟର ପେନିସିଲିନ୍ ଏବଂ 0.05 ମିଟର ଷ୍ଟ୍ରେପଟୋମାଇସିନ୍ |37 ° C ରେ 5% CO2 ସହିତ ଏକ ଇନକ୍ୟୁବେଟରରେ କୋଷଗୁଡିକ ସଂସ୍କୃତ କରାଯାଇଥିଲା |ଅନ୍ୟ ଏକ ଗ୍ଲୋମା ସେଲ୍ ଲାଇନ୍, U118, U87 କୋଷଗୁଡ଼ିକ ସହିତ ତୁଳନା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହେଲା |
T. gondii- ସଂକ୍ରମିତ RH ଏବଂ ME49 ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ ଠାରୁ ଏକ୍ସୋସୋମ୍କୁ ପୃଥକ କରିବା ପାଇଁ, 3-4 ଦିନ ପୂର୍ବରୁ ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ଦିଆଯାଇଥିବା 6 ସପ୍ତାହ ପୁରୁଣା BALB / c ମୂଷାଙ୍କ ପେଟ ଗୁହାଳରୁ ଟି.ଗୋଣ୍ଡାଇ ଟାଚିଜାଇଟ୍ସ (RH ଷ୍ଟ୍ରେନ୍) ଅମଳ କରାଯାଇଥିଲା |ଟାଚାଇଜାଇଟ୍ସ ପିବିଏସ୍ ସହିତ ତିନିଥର ଧୋଇ ଦିଆଗଲା ଏବଂ 40% ପେରକୋଲ୍ (ସିଗମା-ଆଲଡ୍ରିଚ୍, ସେଣ୍ଟ୍ ଲୁଇସ୍, MO, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) 43 ରେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ ଦ୍ୱାରା ଶୁଦ୍ଧ କରାଯାଇଥିଲା |ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ ME49 ର ଟାଚାଇଜାଇଟ୍ ପାଇବା ପାଇଁ, BALB / c ମୂଷାମାନଙ୍କୁ 20 ଟି ଟିସୁ ସିଷ୍ଟ ସହିତ ଇଣ୍ଟରପେରାଇଟୋନିଆଲ୍ ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ଦିଆଯାଇଥିଲା ଏବଂ ସଂକ୍ରମଣର 6-8 ଦିନରେ ପେଟର ଗୁହାଳ ଧୋଇ ସିଷ୍ଟରେ ଟାଚିଜାଇଟ୍ ଟ୍ରାନ୍ସଫର୍ମ ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା |ମୂଷାମାନେ PBS ଦ୍ infected ାରା ସଂକ୍ରମିତ ହୋଇଥିଲେ।100 μg / ml ପେନିସିଲିନ୍ (ଗିବକୋ / BRL, ଗ୍ରାଣ୍ଡ ଦ୍ୱୀପ, NY, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର), 100 μg / ml ଷ୍ଟ୍ରେପଟୋମାଇସିନ୍ (ଗିବକୋ / BRL) ଏବଂ 5% ଭ୍ରୁଣ ବୋଭାଇନ୍ ସେରମ୍ (ଲୋଞ୍ଜା, ୱାକର୍ସଭିଲ୍, MD) ସହିତ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟ ହୋଇଥିବା କୋଷଗୁଡିକରେ ME49 ଟାଚିଜାଇଟ୍ ବୃଦ୍ଧି କରାଯାଇଥିଲା | ।।, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) 37 ° C ଏବଂ 5% କାର୍ବନ ଡାଇଅକ୍ସାଇଡ୍ |ଭେରୋ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଚାଷ ପରେ, ME49 ଟାଚାଇଜାଇଟ୍ 25 ଗେଜ୍ ଛୁଞ୍ଚି ଦ୍ twice ାରା ଦୁଇଥର ଏବଂ ପରେ 5 µm ଫିଲ୍ଟର୍ ମାଧ୍ୟମରେ ଆବର୍ଜନା ଏବଂ କୋଷଗୁଡିକ ବାହାର କରିବାକୁ ପଠାଗଲା |ଧୋଇବା ପରେ, ଟାଚିଜୋଏଟ୍ ଗୁଡିକ PBS44 ରେ ପୁନ us ପଠାଗଲା |ଟକ୍ସୋପ୍ଲାସ୍ମା ଗୋଣ୍ଡାଇ ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ ME49 ର ଟିସୁ ସିଷ୍ଟସ୍ ସଂକ୍ରମିତ C57BL / 6 ମୂଷାଙ୍କ ମସ୍ତିଷ୍କରୁ ବିଚ୍ଛିନ୍ନ ସିଷ୍ଟର ଇଣ୍ଟରପେରାଇଟୋନିଆଲ୍ ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ୍ ଦ୍ୱାରା ପରିଚାଳିତ ହୋଇଥିଲା (ଓରିଏଣ୍ଟ ବାୟୋ ଆନିମଲ୍ ସେଣ୍ଟର, ସେଓଙ୍ଗନାମ୍, କୋରିଆ) |ME49 ସଂକ୍ରମିତ ମୂଷାଙ୍କ ମସ୍ତିଷ୍କ 3 ମାସର PI ପରେ ଅମଳ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ସିଷ୍ଟକୁ ପୃଥକ କରିବା ପାଇଁ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପ୍ ତଳେ ଛୋଟ କରାଯାଇଥିଲା |ସଂକ୍ରମିତ ମୂଷାମାନଙ୍କୁ ସିଓଲ୍ ନ୍ୟାସନାଲ ୟୁନିଭରସିଟି ସ୍କୁଲ୍ ଅଫ୍ ମେଡିସିନ୍ରେ ସ୍ pat ତନ୍ତ୍ର ପାଥୋଜେନ ମୁକ୍ତ ଅବସ୍ଥାରେ (ଏସପିଏଫ୍) ରଖାଯାଇଥିଲା।
ନିର୍ମାତାଙ୍କ ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ, BV2 କୋଷ ଏବଂ ଟିସୁରୁ ମୋଟ RNA ବାହାର କରାଯାଇଥିଲା, ନିର୍ମାତାଙ୍କ ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ, ଏଲ୍ୟୁସନ ଷ୍ଟେପ୍ ପାଇଁ ଇନକ୍ୟୁବେସନ ସମୟ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରି |ଏକ NanoDrop 2000 ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରଫୋଟୋମିଟରରେ RNA ଏକାଗ୍ରତା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା |ଏକ Agilent 2100 bioanalyzer (Agilent Technologies, Amstelveen, ନେଦରଲ୍ୟାଣ୍ଡ) ବ୍ୟବହାର କରି RNA ମାଇକ୍ରୋରେର ଗୁଣର ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଇଥିଲା |
10% ଏକ୍ସୋସୋମ-ଗରିବ FBS ସହିତ DMEM ଅଲଟ୍ରାସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ ଦ୍ 100 ାରା 100,000g ରେ 16 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 4 ° C ରେ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ 0.22 µm ଫିଲ୍ଟର୍ (ନାଲଜେନ୍, ରୋଚେଷ୍ଟର, NY, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ମାଧ୍ୟମରେ ଫିଲ୍ଟର୍ କରାଯାଇଥିଲା |BV2 କୋଷଗୁଡିକ, 5 × 105, DMEM ରେ 10% ଏକ୍ସୋଜୋମ୍-ହ୍ରାସ ହୋଇଥିବା FBS ଏବଂ 37% C ଏବଂ 5% CO2 ରେ 1% ଆଣ୍ଟିବାୟୋଟିକ୍ ଧାରଣ କରିଥିଲା ​​|24 ଘଣ୍ଟା ଇନକ୍ୟୁବେସନ ପରେ, ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ RH କିମ୍ବା ME49 (MOI = 10) ର ଟାଚାଇଜାଇଟ୍ ଗୁଡିକ କୋଷରେ ଯୋଡା ଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଆକ୍ରମଣକାରୀ ପରଜୀବୀଗୁଡିକ ଏକ ଘଣ୍ଟା ମଧ୍ୟରେ ବାହାର କରାଯାଇ DMEM ରେ ପୁରଣ କରାଯାଇଥିଲା |BV2 କୋଷଗୁଡ଼ିକରୁ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ଗୁଡିକ ବହୁଳ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ପଦ୍ଧତିକୁ ପରିବର୍ତ୍ତିତ ଡିଫେରିଏଲ୍ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ ଦ୍ୱାରା ପୃଥକ କରାଯାଇଥିଲା |RNA କିମ୍ବା ପ୍ରୋଟିନ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ 300 µl PBS ରେ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ପେଲେଟକୁ ପୁନ us ପଠାନ୍ତୁ |ବିଚ୍ଛିନ୍ନ ଏକ୍ସୋଜୋମର ଏକାଗ୍ରତା ଏକ ବିସିଏ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଆସେ କିଟ୍ (ପିରେସ୍, ରକ୍ଫୋର୍ଡ, ଆଇଏଲ୍, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ଏବଂ ଏକ ନାନୋ ଡ୍ରପ୍ 2000 ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରଫୋଟୋମିଟର ବ୍ୟବହାର କରି ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା |
BV2 କୋଷରୁ ନିର୍ଗତ ବା BV2 ରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ ଏକ୍ସୋସୋମଗୁଡିକ PRO-PREP ™ ପ୍ରୋଟିନ୍ ନିଷ୍କାସନ ସମାଧାନରେ (iNtRon ବାୟୋଟେକ୍ନୋଲୋଜି, ସେଓଙ୍ଗନାମ୍, କୋରିଆ) ଲାଇସେଡ୍ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ କୁମାସି ଉଜ୍ଜ୍ୱଳ ନୀଳ ରଙ୍ଗର 10% SDS ପଲିୟାକ୍ରିଲାମାଇଡ୍ ଜେଲରେ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଧାରଣ କରାଯାଇଥିଲା |ଏଥିସହ, ପ୍ରୋଟିନ୍ ଗୁଡିକ PVDF br ୁଲାକୁ 2 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ କରାଯାଇଥିଲା |ପାଶ୍ଚାତ୍ୟ ବ୍ଲଟ୍ ଗୁଡିକ ଏକ ଏକ୍ସୋସୋମାଲ୍ ମାର୍କର ଭାବରେ ଆଲିକ୍ସ ଆଣ୍ଟିବଡି (ସେଲ୍ ସିଗନାଲିଂ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି, ବେଭର୍ଲି, MA, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ବ୍ୟବହାର କରି ବ valid ଧ ହେଲା |HRP- କଞ୍ଜୁଗେଟେଡ୍ ଛେଳି ଆଣ୍ଟି-ମାଉସ୍ IgG (H + L) (ବେଥାଇଲ୍ ଲାବୋରେଟୋରୀ, ମଣ୍ଟଗୋମେରୀ, TX, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ଏବଂ ଏକ LAS-1000 ପ୍ଲସ୍ ଲ୍ୟୁମାଇସେଣ୍ଟ୍ ଇମେଜ୍ ଆନାଲିଜର୍ (ଫୁଜି ଫଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ଫିଲ୍ମ, ଟୋକିଓ, ଜାପାନ) ଦ୍ secondary ିତୀୟ ଆଣ୍ଟିବଡି ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା |।ଏକ୍ସୋଜୋମର ଆକାର ଏବଂ ମର୍ଫୋଲୋଜି ଅଧ୍ୟୟନ ପାଇଁ ଟ୍ରାନ୍ସମିସନ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋନ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି କରାଯାଇଥିଲା |BV2 କୋଷଗୁଡିକ (6.40 µg / µl) ରୁ ବିଚ୍ଛିନ୍ନ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ କାର୍ବନ-ଆବୃତ ମେସ୍ ଉପରେ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ 1 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 2% ୟୁରାନିଲ୍ ଆସେଟେଟ୍ ସହିତ ନକାରାତ୍ମକ ଭାବରେ ଦାଗଯୁକ୍ତ |ପ୍ରସ୍ତୁତ ନମୁନାଗୁଡିକ ଏକ ES1000W ଏରଲାଙ୍ଗସେନ୍ ସିସିଡି କ୍ୟାମେରା (ଗାଟାନ୍, ପ୍ଲିଜାଣ୍ଟନ୍, CA, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ସହିତ ସଜ୍ଜିତ JEOL 1200-EX II (ଟୋକିଓ, ଜାପାନ) ବ୍ୟବହାର କରି 80 କେଭିର ତ୍ୱରାନ୍ୱିତ ଭୋଲଟେଜରେ ଦେଖାଗଲା |
ରୁମ୍ ତାପମାତ୍ରାରେ 15 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ PKH26 ରେଡ୍ ଫ୍ଲୋରୋସେଣ୍ଟ୍ ଲିଙ୍କର୍ କିଟ୍ (ସିଗମା-ଆଲଡ୍ରିଚ୍, ସେଣ୍ଟ୍ ଲୁଇସ୍, MO, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ବ୍ୟବହାର କରି BV2- ଉତ୍ପାଦିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ଗୁଡିକ ଦାଗଯୁକ୍ତ |U87 କୋଷଗୁଡିକ, 2 × 105, PKH26- ଲେବଲ୍ ହୋଇଥିବା ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ (ଲାଲ୍) କିମ୍ବା ନକାରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଭାବରେ କ ex ଣସି ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ସହିତ, 37% C ରେ 24 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 5% CO2 ଇନକ୍ୟୁବେଟରରେ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା |U87 ସେଲ୍ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟଗୁଡିକ DAPI (ନୀଳ) ସହିତ ଦାଗଯୁକ୍ତ, U87 କୋଷଗୁଡିକ 4% ପାରାଫର୍ମାଲଡିହାଇଡରେ 15 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 4 ° C ରେ ସ୍ଥିର କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ତା’ପରେ ଏକ Leica TCS SP8 STED CW କନଫୋକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପ୍ ସିଷ୍ଟମ୍ (ଲାଇକା ମାଇକ୍ରୋ ସିଷ୍ଟମ୍, ମାନହାଇମ୍, ଜର୍ମାନୀ) ରେ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା |ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣଯୋଗ୍ୟ |
ମିର- X siRNA ପ୍ରଥମ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ ସିନ୍ଥେସିସ୍ ଏବଂ SYBR qRT-PCR କିଟ୍ (ଟାକରା ବାୟୋ ଇନକ୍।, ଶିଗା, ଜାପାନ) ବ୍ୟବହାର କରି cDNA siRNA ରୁ ସିନ୍ଥାଇଜ୍ ହୋଇଥିଲା |SYBR ପ୍ରେମିକ୍ସ ସହିତ ମିଶ୍ରିତ ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ପ୍ରକୃତ ସମୟ ପରିମାଣିକ PCR iQ5 ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ଚିହ୍ନଟ ପ୍ରଣାଳୀ (ବାୟୋ-ରେଡ୍, ହର୍କ୍ୟୁଲସ୍, CA, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ବ୍ୟବହାର କରି କାର୍ଯ୍ୟ କରାଯାଇଥିଲା |15 ସେକେଣ୍ଡ ପାଇଁ 95 ° C ରେ 40 ଚକ୍ର ଏବଂ 40 ° ଚକ୍ରରେ ଡିଏନ୍ଏ ବୃଦ୍ଧି କରାଯାଇଥିଲା |ପ୍ରତ୍ୟେକ PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରୁ ତଥ୍ୟ iQ ™ 5 ଅପ୍ଟିକାଲ୍ ସିଷ୍ଟମ୍ ସଫ୍ଟୱେର୍ (ବାୟୋ-ରେଡ୍) ର ଡାଟା ଆନାଲିସିସ୍ ମଡ୍ୟୁଲ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା |ମନୋନୀତ ଲକ୍ଷ୍ୟ ଜିନ୍ ଏବଂ β- ଆକ୍ଟିନ୍ / siRNA (ଏବଂ U6) ମଧ୍ୟରେ ଜିନ୍ ଅଭିବ୍ୟକ୍ତିର ଆପେକ୍ଷିକ ପରିବର୍ତ୍ତନଗୁଡିକ ମାନକ ବକ୍ର ପଦ୍ଧତି ବ୍ୟବହାର କରି ଗଣନା କରାଯାଇଥିଲା |ବ୍ୟବହୃତ ପ୍ରାଥମିକ କ୍ରମଗୁଡ଼ିକ ସାରଣୀ 1 ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି |
3 x 104 U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷଗୁଡିକ 96-କୂଅ ପ୍ଲେଟରେ ବିହନ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ 12, 18 ଏବଂ 36 ଘଣ୍ଟାରେ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଭାବରେ BV2 (50 μg / mL) କିମ୍ବା BV2 (50 μg / mL) ରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା-ସଂକ୍ରମିତ ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ ସହିତ ମିଶ୍ରିତ ହୋଇଥିଲା | ।ସେଲ୍ ଗଣନା କିଟ୍ -8 (ଡୋଜିଣ୍ଡୋ, କୁମାମୋଟୋ, ଜାପାନ) (ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଫିଗର୍ସ S1-S3) 46 ବ୍ୟବହାର କରି କୋଷ ବିସ୍ତାର ହାର ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା |
5-ସପ୍ତାହ ବୟସ୍କା ମହିଳା BALB / c ନଗ୍ନ ମୂଷା ଓରିଏଣ୍ଟ ବାୟୋ (ସେଓଙ୍ଗନାମ୍-ସି, ଦକ୍ଷିଣ କୋରିଆ) ରୁ କିଣାଯାଇଥିଲା ଏବଂ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରା (22 ± 2 ° C) ଏବଂ ଆର୍ଦ୍ରତା (45 ± 15 ° C) ରେ ପୃଥକ ପୃଥକ ଭାବରେ ରଖାଯାଇଥିଲା |କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ (22 ± 2 ° C) ଏବଂ ଆର୍ଦ୍ରତା (45 ± 15%) |ଏସପିଏଫ୍ (ସିଓଲ୍ ନ୍ୟାସନାଲ୍ ୟୁନିଭରସିଟି ସ୍କୁଲ୍ ଅଫ୍ ମେଡିସିନ୍ ପ୍ରାଣୀ କେନ୍ଦ୍ର) ଅଧୀନରେ ଏକ 12 ଘଣ୍ଟିଆ ଆଲୋକ ଚକ୍ର ଏବଂ 12 ଘଣ୍ଟିଆ ଅନ୍ଧକାର ଚକ୍ର କରାଯାଇଥିଲା |ମୂଷାମାନେ ଅନିୟମିତ ଭାବରେ ପ୍ରତ୍ୟେକ 5 ଟି ମୂଷାର ତିନୋଟି ଗୋଷ୍ଠୀରେ ବିଭକ୍ତ ହୋଇଥିଲେ ଏବଂ ସମସ୍ତ ଗୋଷ୍ଠୀକୁ 400 ମିଲି ମିଟର ପିବିଏସ୍ ସହିତ 1 x 107 U87 ଗ୍ଲୋମା କୋଷ ଧାରଣ କରିଥିବା ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ଦିଆଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଅଭିବୃଦ୍ଧି କାରକ BD Matrigel ™ (BD Science, Miami, FL, USA) କୁ ହ୍ରାସ କରିଥିଲା ​​|ଟ୍ୟୁମର ଇଞ୍ଜେକ୍ସନର ଛଅ ଦିନ ପରେ, BV2 କୋଷରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ 200 ମିଗ୍ରା ଏକ୍ସୋଜୋମ୍ (ଟକ୍ସୋପ୍ଲାଜମା ସଂକ୍ରମଣ ସହିତ / ବିନା) ଟ୍ୟୁମର ସ୍ଥାନରେ ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ଦିଆଗଲା |ଟ୍ୟୁମର ସଂକ୍ରମଣର ବାଇଶି ଦିନ ପରେ, ପ୍ରତ୍ୟେକ ଗୋଷ୍ଠୀର ମୂଷାଙ୍କ ଟ୍ୟୁମର ଆକାର ସପ୍ତାହରେ ତିନିଥର କାଲିପର୍ ସହିତ ମାପ କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ ଟ୍ୟୁମର ପରିମାଣ ସୂତ୍ର ଦ୍ୱାରା ଗଣନା କରାଯାଇଥିଲା: ×। × × (ମୋଟେଇ) × 2 × ଲମ୍ବ |
MiRCURYTM LNA miRNA ଆରେ ବ୍ୟବହାର କରି ମାଇକ୍ରୋ ଆରଏନ୍ଏ ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ବିଶ୍ଳେଷଣ, ସପ୍ତମ ପି generation ଼ିର, mmu ଏବଂ rno ଆରେ (EXIQON, Vedbaek, ଡେନମାର୍କ) 3100 ମାନବ, ମାଉସ୍ ଏବଂ ମୂଷା miRNA କ୍ୟାପଚର ପ୍ରୋବ ମଧ୍ୟରେ 1119 ଟି ଭଲ-ବର୍ଣ୍ଣିତ ମୂଷାକୁ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରେ |ଏହି ପ୍ରକ୍ରିୟା ସମୟରେ, ବାଛୁରୀ ଅନ୍ତ est ସ୍ଥ କ୍ଷାରୀୟ ଫସଫାଟେଜ୍ ସହିତ ଚିକିତ୍ସା ଦ୍ 5 ାରା 5′-ଫସଫେଟ୍ ରୁ ମୋଟ RNA ର 250 ରୁ 1000 ng ଅପସାରଣ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ପରେ Hy3 ସବୁଜ ଫ୍ଲୋରୋସେଣ୍ଟ୍ ରଙ୍ଗ ସହିତ ଲେବଲ୍ କରାଯାଇଥିଲା |ପରେ ଲେବଲ୍ ହୋଇଥିବା ନମୁନାଗୁଡିକ ହାଇବ୍ରିଡାଇଜେସନ୍ ଚାମ୍ବର କିଟ୍ (ଆଜିଲିଣ୍ଟ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି, ସାଣ୍ଟା କ୍ଲାରା, CA, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ଏବଂ ହାଇବ୍ରିଡାଇଜେସନ୍ ସ୍ଲାଇଡ୍ କିଟ୍ (ଆଜିଲିଣ୍ଟ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି) ବ୍ୟବହାର କରି ମାଇକ୍ରୋଏରେ ସ୍ଲାଇଡ୍ ଲୋଡ୍ କରି ହାଇବ୍ରିଡାଇଜ୍ କରାଯାଇଥିଲା |ହାଇବ୍ରିଡାଇଜେସନ୍ 16 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 56 ° C ରେ କରାଯାଇଥିଲା, ତାପରେ ମାଇକ୍ରୋରେରଗୁଡିକ ନିର୍ମାତାଙ୍କ ସୁପାରିଶ ଅନୁଯାୟୀ ଧୋଇଗଲା |ପ୍ରକ୍ରିୟାକୃତ ମାଇକ୍ରୋଏରେ ସ୍ଲାଇଡ୍ ଗୁଡିକ ଏକ Agilent G2565CA ମାଇକ୍ରୋଏରେ ସ୍କାନର୍ ସିଷ୍ଟମ୍ (ଆଜିଲିଣ୍ଟ୍ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି) ବ୍ୟବହାର କରି ସ୍କାନ୍ କରାଯାଇଥିଲା |ଆଜିଲିଣ୍ଟ ଫିଚର୍ ଏକ୍ସଟ୍ରାକସନ୍ ସଫ୍ଟୱେର୍ ସଂସ୍କରଣ 10.7.3.1 (ଆଜିଲିଣ୍ଟ୍ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି) ବ୍ୟବହାର କରି ସ୍କାନ୍ ହୋଇଥିବା ପ୍ରତିଛବିଗୁଡିକ ଆମଦାନୀ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ପରିବର୍ତ୍ତିତ Exiqon ପ୍ରୋଟୋକଲର ଅନୁରୂପ GAL ଫାଇଲ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ପ୍ରତ୍ୟେକ ପ୍ରତିଛବିର ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ତୀବ୍ରତା ପରିମାଣ କରାଯାଇଥିଲା |ସାମ୍ପ୍ରତିକ ଅଧ୍ୟୟନ ପାଇଁ ମାଇକ୍ରୋଏରେ ଡାଟା ଜିଓ ଡାଟାବେସରେ GPL32397 ଅନ୍ତର୍ଗତ ଜମା ଡାଟାବେସରେ ଜମା ହୋଇଛି |
ବିଭିନ୍ନ ନେଟୱାର୍କ ଉପକରଣ ବ୍ୟବହାର କରି RH କିମ୍ବା ME49 ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ ର ମାଇକ୍ରୋଗ୍ଲିଆରେ ପରିପକ୍ୱ ଏକ୍ସୋସୋମାଲ୍ miRNA ର ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ପ୍ରୋଫାଇଲ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା |miRWalk2.0 (http://mirwalk.umm.uni-heidelberg.de) ବ୍ୟବହାର କରି ଟ୍ୟୁମର ବିକାଶ ସହିତ ଜଡିତ miRNA ଗୁଡ଼ିକୁ ଚିହ୍ନଟ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ 8.0 ରୁ ଅଧିକ ସାଧାରଣ ସଙ୍କେତ ତୀବ୍ରତା (log2) ସହିତ ଫିଲ୍ଟର୍ କରାଯାଇଥିଲା |MiRNA ଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟରେ, ଭିନ୍ନ ଭିନ୍ନ ଭାବରେ ପ୍ରକାଶିତ miRNA ଗୁଡ଼ିକ ଟି.ଗୋଣ୍ଡାଇ ଦ୍ infected ାରା ସଂକ୍ରମିତ RH କିମ୍ବା ME49 ଷ୍ଟ୍ରେନ୍ ଦ୍ୱାରା ପରିବର୍ତ୍ତିତ miRNA ର ଫିଲ୍ଟର ବିଶ୍ଳେଷଣ ଦ୍ 1.5 ାରା 1.5 ଗୁଣା ଅଧିକ ପରିବର୍ତ୍ତନ ହୋଇଥିବା ଜଣାପଡିଛି |
ଲିପୋଫେକ୍ଟାମାଇନ୍ 2000 (ଇନଭାଇଟ୍ରୋଜେନ୍, କାର୍ଲସବାଡ୍, CA, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ବ୍ୟବହାର କରି ଅପ୍ଟି-ଏମ୍ (ଗିବକୋ, କାର୍ଲସବାଡ୍, CA, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ରେ ଛଅ-କୂଅ ପ୍ଲେଟରେ (3 x 105 କୋଷ / କୂଅ) କୋଷଗୁଡିକ ବିହନ କରାଯାଇଥିଲା |ଟ୍ରାନ୍ସଫେକ୍ଟେଡ୍ କୋଷଗୁଡିକ 6 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ସଂସ୍କୃତି ପ୍ରାପ୍ତ ହେଲା ଏବଂ ତା’ପରେ ମାଧ୍ୟମକୁ ତାଜା ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ମାଧ୍ୟମକୁ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରାଯାଇଥିଲା |ସଂକ୍ରମଣର 24 ଘଣ୍ଟା ପରେ କୋଷଗୁଡିକ ଅମଳ କରାଯାଇଥିଲା |
ପରିସଂଖ୍ୟାନ ବିଶ୍ଳେଷଣ ମୁଖ୍ୟତ Excel Excel ସଫ୍ଟୱେର୍ (ମାଇକ୍ରୋସଫ୍ଟ, ୱାଶିଂଟନ୍, ଡିସି, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ସହିତ ଛାତ୍ରଙ୍କ ଟି-ଟେଷ୍ଟ ବ୍ୟବହାର କରି କରାଯାଇଥିଲା |ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ପ୍ରାଣୀ ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ, ପ୍ରିଜିମ୍ software। Software ସଫ୍ଟୱେର୍ (ଗ୍ରାଫପ୍ୟାଡ୍ ସଫ୍ଟୱେର୍, ଲା ଜୋଲା, CA, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ବ୍ୟବହାର କରି ଏକ ଦୁଇ-ମାର୍ଗ ANOVA କରାଯାଇଥିଲା | P- ମୂଲ୍ୟଗୁଡିକ <0.05 ପରିସଂଖ୍ୟାନ ଦୃଷ୍ଟିରୁ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଭାବରେ ବିବେଚନା କରାଯାଉଥିଲା | P- ମୂଲ୍ୟଗୁଡିକ <0.05 ପରିସଂଖ୍ୟାନ ଦୃଷ୍ଟିରୁ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଭାବରେ ବିବେଚନା କରାଯାଉଥିଲା | Значения П <0,05 считались статистически значимыми। P ମୂଲ୍ୟଗୁଡିକ <0.05 ପରିସଂଖ୍ୟାନ ଦୃଷ୍ଟିରୁ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ବିବେଚନା କରାଯାଉଥିଲା | P 值 <0.05 被 认为 具有 统计学。。 P 值 <0.05 Значения П <0,05 считались статистически значимыми। P ମୂଲ୍ୟଗୁଡିକ <0.05 ପରିସଂଖ୍ୟାନ ଦୃଷ୍ଟିରୁ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ବିବେଚନା କରାଯାଉଥିଲା |
ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ ବ୍ୟବହୃତ ସମସ୍ତ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ପ୍ରୋଟୋକଲଗୁଡିକ ସିଓଲ୍ ନ୍ୟାସନାଲ ୟୁନିଭରସିଟି ସ୍କୁଲ୍ ଅଫ୍ ମେଡିସିନ୍ (IRB ନମ୍ବର SNU-150715-2) ର ଅନୁଷ୍ଠାନିକ ସମୀକ୍ଷା ବୋର୍ଡ ଦ୍ୱାରା ଅନୁମୋଦିତ ହୋଇଥିଲା |
The data used in this study are available upon reasonable request from the first author (BK Jung; mulddang@snu.ac.kr). And the microarray data for the current study is deposited in the GEO database under registration number GPL32397.
ଫର୍ଲି, ଜେ।2018 ରେ ଆନୁମାନିକ ବିଶ୍ global ର କର୍କଟ ରୋଗ ଏବଂ ମୃତ୍ୟୁହାର: GLOBOCAN ଉତ୍ସ ଏବଂ ପଦ୍ଧତି |ବ୍ୟାଖ୍ୟାJ. Ruck 144, 1941–1953 (2019) |
ରଶିଦ୍, ଏସ୍, ରେହମାନ, କେ ଏବଂ ଆକାଶ, ଏମ୍.ଏସ୍ ମସ୍ତିଷ୍କ ଟ୍ୟୁମରର ବିପଦ କାରଣଗୁଡିକ ଏବଂ ସେମାନଙ୍କର ଚିକିତ୍ସା ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ହସ୍ତକ୍ଷେପ ବିଷୟରେ ଏକ ଅନ୍ତର୍ନିହିତ ସୂଚନା | ରଶିଦ୍, ଏସ୍, ରେହମାନ, କେ ଏବଂ ଆକାଶ, ଏମ୍.ଏସ୍ ମସ୍ତିଷ୍କ ଟ୍ୟୁମରର ବିପଦ କାରଣଗୁଡିକ ଏବଂ ସେମାନଙ୍କର ଚିକିତ୍ସା ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ହସ୍ତକ୍ଷେପ ବିଷୟରେ ଏକ ଅନ୍ତର୍ନିହିତ ସୂଚନା |ରସିଦ, ଏସ।, ରେହମାନ, କେ ଏବଂ ଆକାଶ, ଏମଏସ ମସ୍ତିଷ୍କ ଟ୍ୟୁମର ଏବଂ ପ୍ରମୁଖ ଚିକିତ୍ସା ହସ୍ତକ୍ଷେପ ପାଇଁ ବିପଦ କାରଣଗୁଡ଼ିକର ସମୀକ୍ଷା। ରଶିଦ୍, ଏସ୍, ରେହମାନ, କେ ଏବଂ ଆକାଶ, ଏମ୍ଏସ୍ 深入 了解 脑 的。。。 ରଶିଦ୍, ଏସ୍, ରେହମାନ, କେ ଏବଂ ଆକାଶ, ଏମ୍.ଏସ୍ ମସ୍ତିଷ୍କ ଟ୍ୟୁମର ବିପଦ କାରଣ ଏବଂ ଚିକିତ୍ସା ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ହସ୍ତକ୍ଷେପ ବିଷୟରେ ଗଭୀର ବୁ understanding ାମଣା |ରସିଦ, ଏସ।, ରେହମାନ, କେ ଏବଂ ଆକାଶ, ଏମଏସ ମସ୍ତିଷ୍କ ଟ୍ୟୁମର ଏବଂ ପ୍ରମୁଖ ଚିକିତ୍ସା ହସ୍ତକ୍ଷେପ ପାଇଁ ବିପଦ କାରଣଗୁଡ଼ିକର ସମୀକ୍ଷା।ଜ Bi ବ ଚିକିତ୍ସା ବିଜ୍ଞାନ |ଫାର୍ମାସିଷ୍ଟ143, 112119 (2021)
କାଟୋ, I., Zhang ାଙ୍ଗ, ଜେ। ଏବଂ ସୂର୍ଯ୍ୟ, ଜେ। କାଟୋ, I., Zhang ାଙ୍ଗ, ଜେ। ଏବଂ ସୂର୍ଯ୍ୟ, ଜେ।କାଟୋ I., Zhang ାଙ୍ଗ୍ ଜେ ଏବଂ ସନ୍ ଜେ। କାଟୋ, I., Zhang ାଙ୍ଗ, ଜେ। ଏବଂ ସୂର୍ଯ୍ୟ, ଜେ। 人类 口腔 细菌 细菌 细菌 细菌 细菌 କାଟୋ, I., Zhang ାଙ୍ଗ, ଜେ। ଏବଂ ସୂର୍ଯ୍ୟ, ଜେ।କାଟୋ I., Zhang ାଙ୍ଗ୍ ଜେ ଏବଂ ସନ୍ ଜେ।କର୍କଟ 14, 425 (2022) |
ମ୍ୟାଗନ୍, କେ.ଏଲ୍ ଏବଂ ପ୍ୟାରିସ୍, ଜେ.ଏଲ୍ ସଂକ୍ରମଣଠାରୁ ଆରମ୍ଭ କରି କର୍କଟ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ: ଡିଏନ୍ଏ ଟ୍ୟୁମର ଭାଇରସ୍ କିପରି ହୋଷ୍ଟ ସେଲ୍ କେନ୍ଦ୍ରୀୟ କାର୍ବନ ଏବଂ ଲିପଡ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମ୍ ବଦଳାଇଥାଏ | ମ୍ୟାଗନ୍, କେ.ଏଲ୍ ଏବଂ ପ୍ୟାରିସ୍, ଜେ.ଏଲ୍ ସଂକ୍ରମଣଠାରୁ ଆରମ୍ଭ କରି କର୍କଟ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ: ଡିଏନ୍ଏ ଟ୍ୟୁମର ଭାଇରସ୍ କିପରି ହୋଷ୍ଟ ସେଲ୍ କେନ୍ଦ୍ରୀୟ କାର୍ବନ ଏବଂ ଲିପଡ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମ୍ ବଦଳାଇଥାଏ |ମହୋନ୍, କେ.ଏଲ୍ ଏବଂ ପ୍ୟାରିସ୍, ଜେ.ଏଲ୍ କର୍କଟ ରୋଗରେ ଅଗ୍ନି ସଂକ୍ରମଣ: ଡିଏନ୍ଏ ଆଧାରିତ ଟ୍ୟୁମର ଜୀବାଣୁ କିପରି ହୋଷ୍ଟ ସେଲ୍ କେନ୍ଦ୍ରୀୟ କାର୍ବନ ଏବଂ ଲିପିଡ ମେଟାବୋଲିଜିମ୍ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରନ୍ତି | ମାଗନ୍, କେ.ଏଲ୍ ଏବଂ ପ୍ୟାରିସ୍, JL 从 感染 ： ： DNA 肿瘤 病毒 如何 改变。。。 ମ୍ୟାଗନ୍, କେ.ଏଲ୍ ଏବଂ ପ୍ୟାରିସ୍, ଜେ.ଏଲ୍ ସଂକ୍ରମଣଠାରୁ ଆରମ୍ଭ କରି କର୍କଟ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ: ଡିଏନ୍ଏ ଟ୍ୟୁମର ଭାଇରସ୍ ହୋଷ୍ଟ ସେଲ୍ କେନ୍ଦ୍ରୀୟ କାର୍ବନ ଏବଂ ଲିପଡ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମ୍ କୁ କିପରି ବଦଳାଇଥାଏ |ମହୋନ୍, କେ.ଏଲ୍ ଏବଂ ପ୍ୟାରିସ୍, ଜେ.ଏଲ୍ କର୍କଟ ରୋଗରେ ସଂକ୍ରମଣ କରେ: ଡିଏନ୍ଏ ଟ୍ୟୁମର ଜୀବାଣୁ ହୋଷ୍ଟ କୋଷରେ କେନ୍ଦ୍ରୀୟ କାର୍ବନ ଏବଂ ଲିପିଡ ମେଟାବୋଲିଜିମକୁ କିପରି ପରିବର୍ତ୍ତନ କରନ୍ତି |ବାୟୋଲୋଜି ଖୋଲନ୍ତୁ |11, 210004 (2021)
Correia da Costa, JM et al।ସ୍କିଷ୍ଟୋସୋମ ଏବଂ ଯକୃତ ଫ୍ଲୁକ ଏବଂ ହେଲମିନଥ ସହ ଜଡିତ କର୍କଟ ରୋଗର କ୍ୟାଟେଚୋଲ ଇଷ୍ଟ୍ରୋଜେନ |ଆଗଭିତରେ ଗରମ |5, 444 (2014) |